La Inmunocitoquímica como técnica complementaria en el diagnóstico del linfoma canino.

Marco Teórico

El linfoma canino representa el 0.36 % de todas las neoplasias que los afectan, siendo la neoplasia hematopoyética más frecuente, con un 83 % en esta especie^1,4,5,6. Generalmente se presenta en perros de edad media a avanzada, siendo de 6 a 12 años de edad, aunque puede presentarse en perros de cualquier edad. La mayoría de los pacientes con linfoma presentan signos clínicos inespecíficos, pero importantes a la hora de realizar el diagnóstico diferencial^10,11. Se deben  realizar varios procedimientos para establecer el diagnóstico definitivo, conocer la gradificación y estadificación clínica del linfoma5,^13,14. La inmunofenotipificación se refiere a la aplicación de anticuerpos específicos para la diferenciación de antígenos de membrana de linfocitos, con el fin de identificar la línea celular de origen. En la actualidad, de los anticuerpos disponibles para establecer el inmunofenotipo de linfocitos, los más utilizados en el perro son: el anti CD3 de reacción específica para linfocitos T y el anti CD79a para detección específica de linfocitos B, algunos autores refieren el CD20 un tanto inespecífico en perros para detección de linfocitos B, siendo lo contrario en los equinos^13,14.

Planteamiento del Problema

En la actualidad no  basta con determinar el tipo de neoplasia que padece un paciente, ya que muchos de los tratamientos que se proponen y protocolos quimioterapéuticos van siendo cada vez más específicos para un determinado tipo de neoplasia; como es el caso del linfoma, que en medicina veterinaria muchos autores han reportado que es de suma importancia determinar inmunofenotipo del linfoma.

Justificación e impacto del estudio

La utilidad de la inmunocitoquímica (ICQ) en medicina veterinaria ha añadido una nueva dimensión al diagnóstico. La aplicación de la inmunocitoquímica en linfomas caninos  permite determinar con mayor exactitud el inmunofenotipo de la neoplasia, y es que muchos autores refieren mayor importancia al conocimiento de la tipificación que al tipo histológico del linfoma, pues con ello podemos aplicar un tratamiento específico y temprano en beneficio del paciente.

Objetivo del estudio

Emplear la técnica de Inmunocitoquímica en el diagnóstico de linfoma en perros. Comparando las ventajas y desventajas de su uso en  otras técnicas diagnósticas, así como su importancia en el diagnóstico e impacto en la clínica.

Material y Métodos

Se seleccionaron 15 casos de caninos referidos de clínicas veterinarias particulares al servicio de patología, con antecedentes de linfadenomegalia generalizada. Se realizó una base de datos con su anamnesis, historia clínica y examen físico general. Se tomaron muestras para citopatología por medio de la técnica de aspiración con aguja delgada (ACAD) de uno o más linfonodos por paciente. En cada caso se realizaron varias laminillas, unas fijadas al aire, otras en alcohol y una se dejó sin tinción. De las muestras fijadas al aire se tiñeron con la técnica de Wright y las citologías fijadas en alcohol se empleó la tinción de Papanicolaou. Seguido de las tinciones básicas, se evaluaron las muestras y se seleccionaron a los pacientes con diagnóstico citológico de linfoma. Las muestras no teñidas fueron guardadas en un lugar seco y a temperatura ambiente y se seleccionaron por presentar una mayor celularidad, con el fin de realizar el estudio inmunocitoquímico con los anticuerpos anti CD3, CD79a y CD20.

Resultados

De los pacientes seleccionados para este estudio el 59 % correspondió a machos y el 41 % a hembras. La media de la edad de los caninos fue de 7.5 años de edad. Los principales signos clínicos presentados fueron anorexia, letargo, depresión y linfadenomegalia. De los 15 casos se realizó inmunocitoquímica con los anticuerpos anti CD3, CD20 y CD79a. El 60 % (9 casos) correspondieron a linfoma de células B, y un 40 % (6 casos) correspondieron a linfoma de células T. El 82 % de los pacientes con linfoma de células B se encontraba en un estadío clínico IIIb y el 91 % de los casos diagnosticados con linfoma de células T tenía un estadío clínico IVb.

Discusión

Se propone la incorporación de la inmunocitoquímica como técnica complementaria en el diagnóstico del linfoma canino, con el fin de determinar el inmunofenotipo para establecer un pronóstico clínico y con esto proponer una mejor terapéutica. Se mencionan grandes ventajas de esta técnica como es  la rapidez, toma de muestra, material requerido, manejo del paciente y bajo costo en comparación con la inmunohistoquímica, en la que se requiere un estudio histopatológico previo junto con todas las complicaciones de una biopsia.

Se ha reportado en la literatura americana que el 82 % de los linfomas caninos corresponden a linfoma de células B y cerca del 20 % a linfomas de células T. En México hay escasos reportes que hagan referencia a la prevalencia y frecuencia del linfoma en perros, por lo que este estudio abre camino a nuevos horizontes en el conocimiento de esta neoplasia que es frecuente en la clínica veterinaria.

Conclusiones

Los resultados obtenidos en el presente trabajo son de gran ayuda para conocer la aplicación de la inmunocitoquímica en linfomas caninos. La alta frecuencia, rápido crecimiento y bajo pronóstico de vida de estos pacientes hace que se requieran técnicas diagnósticas rápidas, de bajo costo y tempranas con una buena precisión diagnóstica. Hoy en día la tendencia de la citología veterinaria busca perfeccionar su uso en estos pacientes, cada día mejorando y aunándose nuevas técnicas auxiliares como la inmunocitoquímica, inmunohistoquímica, PCR, FISH, Hibridación in situ y citogenética, que en medicina humana ya están a la disposición de los pacientes, no siendo así en medicina veterinaria.